石蜡油存保藏法
1.保存原理石蜡油不仅可以从空气中分离细菌,还可以防止培养基中水分的蒸发,从而减缓细菌的生长,提高成活率。
2.操作程序是将无菌石蜡油注入适度生长的斜面培养物中。液位应高于培养表面的LCM,然后将试管直立储存在4C冰箱中。该方法操作简单,不需要特殊设备,且保质期比简易斜面低温保质期长一年以上。
3.需要注意事项
(1)石蜡油的选择应为化学纯,优质白石蜡油。过量的杂质会导致微生物突变或死亡。
(2)将石蜡油放入体积约为1/3的锥形瓶中,用121℃高压蒸汽灭菌1小时,对石蜡油进行灭菌。为了在高压蒸汽灭菌过程中蒸发进入人体的水,需要加入110℃1000烘烤1小时。
(3)坡度不宜过大,石蜡油不宜过多注入,否则会降低成活率。
(4)有时在第一次移植期间,由于石蜡油的粘附,微生物的生长较差,并且在第二次移植后可恢复原始生长特征。在移植过程中,残留的石蜡油和培养物粘附在接种针上并烧掉接种针。
(5)该方法仅适用于保存真菌,酵母菌,细菌和其他不能使用石蜡油作为碳源的微生物。
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